新城疫（Newcastle Disease，ND）是由新城疫病毒引起的一种禽类高度接触性传染病，主要感染鸡、火鸡、鸽等禽类。该病以呼吸道症状、消化道病变、产蛋量下降和高死亡率为特征，对全球家禽业造成重大经济损失。由于其传播速度快、致死率高，世界动物卫生组织（OIE）将其列为必须通报的动物疫病。及时的检测是防控新城疫的关键，不仅能帮助养殖场快速诊断疫情，还能指导疫苗免疫方案的制定，降低病毒扩散风险。
新城疫检测的核心项目包括病毒分离鉴定、血清学检测和分子生物学检测三大类：
1. 病毒分离与鉴定：通过采集病禽的呼吸道分泌物、脑组织或脾脏样本，接种鸡胚或细胞培养物进行病毒分离。随后通过血凝试验（HA）和血凝抑制试验（HI）确认病毒特性。
2. 血清学检测：主要用于群体免疫状态评估，包括血凝抑制试验（HI）、酶联免疫吸附试验（ELISA）等，检测禽类血清中特异性抗体水平。
3. 分子生物学检测：通过RT-PCR、实时荧光定量PCR（qPCR）或基因测序技术，直接检测病毒核酸并分析毒株基因型，具有高灵敏度和特异性。
1. 病毒分离法：
样本处理→接种9-11日龄鸡胚（尿囊腔）→培养48-72小时→收获尿囊液→HA试验检测病毒→HI试验鉴定毒株。
2. HI试验：
梯度稀释血清→与4单位病毒抗原反应→加入1%鸡红细胞→观察凝集抑制效价，判定抗体水平。
3. RT-PCR检测：
提取样本RNA→逆转录为cDNA→设计特异性引物扩增F基因→凝胶电泳分析产物，判定病毒存在。
国际标准：
OIE《陆生动物诊断试验手册》规定病毒分离为金标准，HI抗体效价≥1:16视为阳性，qPCR检测需针对F基因保守区设计引物。
中国标准：
《GB/T 16550-2020 新城疫诊断技术》明确临床样本采集规范，要求分离毒株需进行致病性试验；血清HI效价≥1:32判定为免疫合格。
欧盟标准：
要求对阳性样本进行病毒基因分型，区分疫苗株与野毒株，并规定检测实验室需通过ISO/IEC 17025认证。
通过规范化的检测流程和标准化的结果判读，可确保新城疫检测结果的准确性，为疫病防控提供科学依据。
